Estimating biological reference intervals for cell blood counts in a dog population / Estimación de los intervalos biológicos de referencia para conteos celulares sanguíneos en una población de perros / Estimando intervalos de referência biológica para contagens de células sanguíneas em uma população de cães

Abstract Background: The results from automated equipment and peripheral blood smears allow correlating clinical data with cellular blood counts (CBC), generating information on pathologies of hematological and non-hematological origin in dogs. Objective: To describe qualitative and quantitative magnitudes of CBC in healthy donor dogs of a blood- bank in Medellín (Colombia). Methods: A descriptive-prospective study was carried out from 146 records of CBC results from a blood-bank. The samples were processed by automated equipment, and trained personnel performed the observation of peripheral blood smears to collect qualitative information. Variables such as age, sex, breed, quantitative results, and observations of the peripheral blood smears were considered. For the definition of biological intervals (BIs), the mean and two standard deviations were used for the data with a normal distribution. Otherwise, the 2.5th and 97.5th percentiles were used. Results: The size, granularity, and cytoplasmic vacuoles in monocytes and polymorphonuclear eosinophils, as well as the presence of Barr chromatin and occasional circulating erythroblasts, were remarkable findings to the peripheral blood smear. With the standardization of data obtained from dogs of large and giant breeds, the present work provides BIs for some of the CBC data in the studied population. Conclusion: The findings of the present study allow approximations to the definition of alterations in blood cells and their counts, which can guide the veterinarian towards an early diagnosis in dogs.

Resumen Antecedentes: Los datos obtenidos de equipos automatizados y extendidos de sangre periférica permiten correlacionar la clínica y los resultados del hemograma, generando información de interés sobre patologías de origen hematológico y no hematológico en perros. Objetivo: Describir las magnitudes cualitativas y cuantitativas del hemograma en perros sanos, donantes de un banco de sangre en Medellín (Colombia). Métodos: Se realizó un estudio descriptivo-prospectivo a partir de 146 registros de resultados de hemograma remitidos por un banco de sangre. Las muestras fueron procesadas por un equipo automatizado y personal entrenado realizó la observación del extendido de sangre periférica para la colección de información de corte cualitativo. Variables como edad, sexo, raza, resultados cuantitativos de las muestras y observaciones al extendido de sangre periférica fueron consideradas. Para la definición de intervalos biológicos (IBs) se utilizaron la media y dos desviaciones estándar para los datos con distribución normal. De lo contrario, se utilizaron los percentiles 2,5 y 97,5. Resultados: El tamaño, granularidad y vacuolas citoplasmáticas en monocitos y polimorfonucleares eosinófilos, así como la presencia de Cromatina de Barr y eritroblastos circulantes ocasionales fueron hallazgos llamativos al extendido de sangre periférica. Con la normalización de los datos para caninos de razas grandes y gigantes, el presente trabajo aporta IBs para algunos de los datos del hemograma en la población estudiada. Conclusión: Los hallazgos del presente estudio permiten aproximaciones a la definición de alteraciones en las células hemáticas y sus conteos, que pueden orientar al médico veterinario hacia un diagnóstico temprano en perros.

Resumo Antecedentes: As informações obtidas de equipamentos automatizados e esfregaços de sangue periférico permitem correlacionar os resultados clínicos e de hemogramas, gerando informações interessantes sobre patologias de origem hematológica e não hematológica em cães. Objetivo: Descrever as magnitudes qualitativa e quantitativa do hemograma em cães saudáveis, doadores de um banco de sangue em Medellín (Colômbia). Métodos: Foi realizado um estudo descritivo-prospectivo a partir de 146 registros de resultados de hemograma encaminhados por um banco de sangue. As amostras foram processadas por uma equipe automatizada e pessoal treinado observou o esfregaço de sangue periférico para a coleta de informações qualitativas. Foram consideradas variáveis como idade, sexo, raça, resultados quantitativos das amostras e observações do esfregaço de sangue periférico. Para a definição de intervalos biológicos (IBs), foram utilizados a média e dois desvios-padrão para os dados com distribuição normal. Caso contrário, foram utilizados os percentis 2,5 e 97,5. Resultados: O tamanho, a granularidade e os vacúolos citoplasmáticos dos monócitos e das células polimorfonucleares dos eosinófilos, bem como a presença da cromatina de Barr e ocasionais eritroblastos circulantes foram achados marcantes na disseminação do sangue periférico. Com a normalização dos dados para cães de raças grandes e gigantes, o presente trabalho fornece IBs para alguns dos dados de hemograma na população estudada. Conclusão: Os achados do presente estudo permitem aproximações à definição de alterações nas células sanguíneas e suas contagens, o que pode orientar o médico veterinário responsável pelo diagnóstico precoce em cães.

Sex determination by observation of barr body in teeth subjected to high temperatures / Determinación del sexo mediante la observación de la cromatina de barr en piezas sometidas a altas temperaturas

Sex determination is one of the keys in the identification process. A useful histological method for sex determination is the observation of Barr chromatin or Barr body. This study determines the effect of high temperatures on the diagnostic performance of the Barr chromatin observation on teeth. Were used 50 healthy teeth from 25 male and 25 female individuals aged between 14 and 44 years. The teeth were divided into 5 groups (each group with 5 female and 5 male teeth) and were exposed to controlled temperatures of 200, 400, 600, 800, and 1000 degrees C for 5 minutes. The coronal pulp was obtained and the tissue was processed and stained with hematoxylin-eosin. Four histological slides of male and 4 of female individuals were randomly selected, for each temperature level, which were observed by conventional microscopy at 100X magnification, each showing 50 cells per plate. The presence of 1 cell with visible sex chromatin was considered positive for females. It was only possible to evaluate the samples from groups subjected to 200 and 400 degrees C. In the groups analyzed, the test showed 100 percent accuracy. The average number of cells found to be positive Barr chromatin was 15 (SD 3.9) at 200 degrees C and 11 (SD 2.8) at 400 degrees C. Hence, it was possible to detect the sex at these temperatures by observing chromatin of the Barr body in dental pulp.

La determinación del sexo es uno de los pilares del proceso de identificación, Un método histológico útil para la determinación del sexo es la observación de cromatina de Barr. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de altas temperaturas sobre el rendimiento diagnóstico de observación de cromatina de Barr en piezas dentarias. Se utilizaron 50 piezas dentarias sanas, 25 de individuos de sexo masculino y 25 de sexo femenino con edades comprendidas entre los 14 y 44 años. Las piezas dentarias fueron divididas en 5 grupos, (cada grupo con 5 piezas de sexo femenino y 5 de sexo masculino) y fueron expuestas a temperaturas controladas de 200°C, 400°C, 600°C, 800°C y 1000°C por 5 minutos. La pulpa coronaria fue obtenida y el tejido fue procesado para H-E. Se seleccionaron aleatoriamente 4 placas histológicas de individuos de sexo masculino y 4 de sexo femenino, por cada nivel de temperatura, las cuales fueron observadas por microscopía convencional a un aumento de 100X, observándose 50 células por placa. La presencia de 1 célula con cromatina sexual visible se consideró positiva para el sexo femenino. Sólo fue posible evaluar las muestras provenientes de los grupos sometidos a 200°C y 400°C. En los grupos analizados la prueba presentó un 100 por ciento de exactitud. El número medio de células Barr positivas encontradas fue de 15 (DS 3,9) a 200°C y 11 (DS 2,8) a 400°C, por lo que a estas temperaturas fue posible el diagnóstico del sexo mediante la observación de la cromatina sexual en pulpa dental.

Sex chromatin in dental pulp: performance of diagnosis test and gold atandard generation / Cromatina sexual en pulpa dental: rendimiento de la prueba diagnóstica y generación del gold standard

The sex chromatin or Barr body is a condensation of chromatin present at the nucleus of cells in female individuals. Their observation is possible in different cell types and is used for the rapid diagnosis of biological sex. The observation of this condensation in cells of the pulp tissue can be useful in the forensic diagnosis of sex, primarily because of the protection it give dental hard tissues, but its diagnostic value has not been tested. The purpose of this study is to analyze the diagnostic value of the observation of sex chromatin in cells of the pulp tissue. We used 40 premolars and third molars 20 from men with a mean age of 20.6 years (SD 8.8) and 20 from women with a mean age of 20.4 years (SD 7.4). The pulp was obtained from teeth extracted and localized 50 cells per plate. The presence of a cell with visible Barr body was considered positive for women. With these results, we evaluated the diagnostic performance of the test. The performance of the test was 100 percent; of the 50 cells observed per plate, mean Barr bodies positive cells was 20.4 (SD 0.44) in female samples. There was no positive cell in preparations of male subjects. The diagnostic test observation of sex chromatin in dental pulp is a reliable test for sex determination. This study provides a gold standard for performance assessment in which the teeth have suffered extreme physical conditions, such as incineration and dumping.

La cromatina sexual o de Barr es una condensación de cromatina presente a nivel del núcleo de las células de individuos de sexo femenino. Su observación es posible en diversos tipos celulares y es utilizado para el diagnóstico rápido del sexo biológico. La observación de esta condensación en células del tejido pulpar puede ser útil en el diagnóstico forense del sexo, principalmente debido a la protección que los tejidos duros dentarios le otorgan, sin embargo su valor diagnóstico no ha sido analizado. El propósito de este estudio es analizar el valor diagnóstico de la observación de la cromatina sexual en células del tejido pulpar. Se utilizaron 40 premolares y terceros molares maxilares, 20 de hombres con una media de edad de 20,6 años (DS 8,8) y 20 de mujeres con una edad media de 20,4 años (DS 7,4). La pulpa fue obtenida a partir de piezas extraídas, se realizó la extirpación pulpar y el tejido fue procesado para H-E. Se seleccionaron aleatoriamente 4 placas histológicas, las cuales fueron observadas de manera sistemática utilizando una microscopia Olimpus CX21 con aumento 100X, localizándose 50 células por placa. La presencia de 1 célula con cromatina sexual visible se consideró positivo para sexo femenino. Con estos resultados se evaluó el rendimiento diagnóstico de la prueba. El rendimiento de la prueba fue del 100 por ciento, de las 50 células observadas por placa, la media de células cromatina sexual positiva fue de 20,4 (DS 0,44) en muestras de sexo femenino. No se observó ninguna célula positiva en preparaciones de sujetos de sexo masculino. La prueba diagnóstica observación de la cromatina sexual en pulpa dentaria es una prueba confiable para la determinación del sexo. Este estudio establece un gold estándar para la evaluación del rendimiento en los que las piezas dentarias han sufrido de condiciones físicas extremas como incineración, inmersión, etc.